利用线粒体膜电位测定筛选参与细胞凋亡的人类新基因

• 作 者: 骆叶 王兰 高霞 邓唯唯 于鹏 张晨颖 陆阳 郝钰 石太平
• 机 构: 国家人类基因组北方研究中心,北京,100176北京中医药大学基础医学院免疫学教研室,北京,100029;国家人类基因组北方研究中心,北京,100176;北京大学医学部基础医学院医学免疫学实验室,北京,
• 出 处: 生物化学与生物物理进展
• 发表日期: 2007年7期
• 关键词: 高通量筛选 细胞凋亡 线粒体膜电位 荧光 新基因

细胞凋亡(apoptosis)属于细胞程序化死亡(programmed cell death),是细胞内涉及到许多生化反应的复杂过程.建立了基于细胞水平的凋亡筛选模型,用于筛选人类基因组中功能未知的序列,以发现与细胞凋亡相关的新基因.通过构建人类未知基因的表达文库,并将未知基因表达载体瞬时转染HeLa细胞,用阳离子染料JC-1标记HeLa细胞线粒体内膜并检测线粒体跨膜电位,用流式细胞术进行阳性结果的验证.经过对未知基因表达文库内600个新基因的筛选,得到7个线粒体跨膜电位下降相关新基因(CHMP6、CGI-38、hCAP-H2、NUDT16L1、ARMC1、PHF17和FLJ21103),经实验验证,其中3个基因(CHMP6、CGI-38和hCAP-H2)与细胞凋亡相关.结果表明,所建立的基于细胞的凋亡筛选模型稳定高效,3个细胞凋亡相关基因将被进行深入研究.