目的 探讨甲氨蝶呤(MTX)对映体耐药A549细胞的体外运动能力、浸润侵袭能力差异,从而说明MTX对映体在肿瘤细胞耐药后的侵袭转移过程中的差异.方法 采用浓度递增结合低剂量持续诱导,获得耐受15 μmol/L MTX对映体的细胞系,分别命名为L-(+)-MTX/A549、D-(-)-MTX/A549；用MTT法测定其耐药指数；通过平板划痕实验反映D-(-)-MTX/A549和L-(+)-MTX/A549细胞移动能力；采用双层软琼脂克隆形成实验检测D-(-)-MTX/A549组、L-(+)-MTX/A549组细胞的克隆形成率和集落形成的大小；应用transwell小室实验检测3组细胞体外侵袭能力.结果 L-(+)-MTX/A549、D-(-)-MTX/A549耐药指数分别为(6.1±1.0)和(20.3±1.8).平板划痕实验72 h后L-(+)-MTX/A549细胞进入划痕区的数量少于D-(-)-MTX/A549细胞；软琼脂实验发现D-(-)-MTX/A549组、L-(+)-MTX/A549组以及亲本细胞的集落数分别为(50±7)个克隆、(44±6)个克隆、(52±7)个克隆以及集落形成率分别为(1.68％±0.23％)、(1.49％±0.18％)、(1.73％±0.23％),3组之间差异无统计学意义(P＞0.05),但D-(-)-MTX/A549组细胞的集落形状大小明显大于L-(+)-MTX/A549细胞；transwell小室检测D-(-)-MTX/A549、L-(+)-MTX/A549以及亲本细胞的体外浸润侵袭穿过人工基底膜Matrigel的细胞数分别为(267 ±30)、(106±16)、(134±16)；3组实验的数据均显示D-(-)-MTX/A549组和L-(+)-MTX/A549组以及亲本细胞组差异有统计学意义(P＜0.05),而L-(+)-MTX/A549组与亲本细胞组差异无统计学意义(P＞0.05).结论 D-(-)-MTX诱导的非小细胞肺癌A549耐药细胞在体外运动、浸润侵袭力均大于L-(+)-MTX耐药细胞,从而说明MTX对映体耐药细胞后细胞的转移力有差异。
甲氨蝶呤对映体耐药A549细胞侵袭、转移能力的差异分析
【摘 要】
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目的 探讨甲氨蝶呤(MTX)对映体耐药A549细胞的体外运动能力、浸润侵袭能力差异,从而说明MTX对映体在肿瘤细胞耐药后的侵袭转移过程中的差异.方法 采用浓度递增结合低剂量持续诱导,获得耐受15 μmol/L MTX对映体的细胞系,分别命名为L-(+)-MTX/A549、D-(-)-MTX/A549；用MTT法测定其耐药指数；通过平板划痕实验反映D-(-)-MTX/A549和L-(+)-MTX/A
【机 构】
：
241001安徽芜湖,皖南医学院弋矶山医院核医学科,安徽医科大学附属省立医院,安徽省临床检验中心,安徽医科大学附属省立医院,安徽省临床检验中心,南京市第一医院检验科
【出 处】
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中华医学杂志
【发表日期】
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2012年92期
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