【摘 要】
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目的:探讨Circ-0032131对骨关节炎软骨细胞增殖及炎症因子分泌的影响及分子机制.方法:选取本院17例骨关节炎患者的软骨组织以及正常组织为研究对象;将软骨细胞CHON-001分为control组、IL-1β组、IL-1β+si-Circ-0032131 组、IL-1β+si-NC 组、IL-1β+miR-140-3p mimics 组、IL-1β+miR-mimics-NC 组、IL-1β+si-NC+miR-inhibitor-NC 组、IL-1β+si-Circ-0032131+miR-inhi
【机 构】
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琼海市人民医院骨科,海南琼海 571499
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目的:探讨Circ-0032131对骨关节炎软骨细胞增殖及炎症因子分泌的影响及分子机制.方法:选取本院17例骨关节炎患者的软骨组织以及正常组织为研究对象;将软骨细胞CHON-001分为control组、IL-1β组、IL-1β+si-Circ-0032131 组、IL-1β+si-NC 组、IL-1β+miR-140-3p mimics 组、IL-1β+miR-mimics-NC 组、IL-1β+si-NC+miR-inhibitor-NC 组、IL-1β+si-Circ-0032131+miR-inhibitor-NC组、IL-1β+si-Circ-0032131+miR-140-3p inhibitor组.实时荧光定量 PCR(RT-qPCR)检测Circ-0032131和miR-140-3p的表达水平;Western blot检测蛋白表达;MTT检测细胞增殖;平板实验检测细胞克隆形成数;ELISA检测TNF-α、IL-6水平;双荧光素酶报告实验验证Circ-0032131和miR-140-3p的靶向关系.结果:与正常组织相比,骨关节炎患者软骨组织中Circ-0032131表达水平升高,miR-140-3p表达水平降低(P＜0.05).IL-1β诱导的软骨细胞中MMP1、MMP13表达水平升高,Collagen Ⅱ表达水平降低,细胞OD值降低,细胞克隆形成数降低,CyclinD1表达水平降低,P21表达水平升高,TNF-α、IL-6水平升高(P＜0.05).沉默Circ-0032131或过表达miR-140-3p后,IL-1β诱导的软骨细胞中细胞OD值升高,细胞克隆形成数升高,CyclinD1表达水平升高,P21表达水平降低,TNF-α、IL-6水平降低(P＜0.05)oCirc-0032131靶向调控miR-140-3p表达;干扰miR-140-3p能逆转沉默Circ-0032131对骨关节炎软骨细胞增殖及炎症因子分泌的影响.结论:Circ-0032131可能通过靶向miR-140-3p调控IL-1β诱导的软骨细胞增殖及炎症因子分泌.
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