牙鲆碱性磷酸酶基因5＇调控区的克隆及其功能检测

• 作 者: 施志仪 顾一峰 陈晓武 胡燕林
• 机 构: 上海水产大学生物技术研究中心
• 出 处: 生物技术通报
• 发表日期: 2008年2期
• 关键词: 碱性磷酸酶 基因 5'调控区 克隆 功能 Alkaline phosphatase Gene 5＇regulation region Clone Fun

通过基因组步移的方法扩增出一段924bp的牙鲆碱性磷酸酶基因5＇调控区序列，在线软件分析表明5＇调控区内可能含有GKLF、Oct、CREB、E2F、CEBP、GATA-1、Pitx-1、Pit1、RARE／TRE、AP4等转录因子结合位点。采用DNA重组的方法，将克隆得到的5＇调控区片段插入启动子缺失的增强型绿色荧光蛋白表达载体pEGFP-1中，构建重组表达载体pEGFP-JFALP。重组载体瞬时转染COS-7细胞，在倒置荧光显微镜下可以检测到绿色荧光信号，且荧光信号随着时间的延长而增强。结果表明本实验克