【摘 要】
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目的 考察献血员血浆中抗EV71中和抗体的状况,同时建立适宜的高通量筛选EV71特免血浆的方法,为制备EV71特异性免疫球蛋白提供技术支持.方法 以经典微量细胞病变中和方法测定血浆样品及市售普通静注丙种球蛋白中EV71抗体滴度,探索用于制备EV71特异性免疫球蛋白血浆的参考指标.据此,建立筛选血浆的高通量阈值中和方法,并与传统方法进行比较.应用筛选的EV71特免血浆制备EV71特免球蛋白,并应用细
【机 构】
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271000泰安,解放军第88医院,230022合肥,同路生物制药股份有限公司,230022合肥,同路生物制药股份有限公司,230022合肥,同路生物制药股份有限公司
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目的 考察献血员血浆中抗EV71中和抗体的状况,同时建立适宜的高通量筛选EV71特免血浆的方法,为制备EV71特异性免疫球蛋白提供技术支持.方法 以经典微量细胞病变中和方法测定血浆样品及市售普通静注丙种球蛋白中EV71抗体滴度,探索用于制备EV71特异性免疫球蛋白血浆的参考指标.据此,建立筛选血浆的高通量阈值中和方法,并与传统方法进行比较.应用筛选的EV71特免血浆制备EV71特免球蛋白,并应用细胞模型和动物模型评价其中和抗体活性.结果 以经典法检测,约20％的原料血浆中抗体滴度达1∶50或以上,混合后的效价为1∶180,达到市售普通静注丙种球蛋白的抗体水平.以480份样品检测,所建立的阈值法与经典方法符合率为88.1％;制备的EV71特免球蛋白质量符合国家标准,EV71中和活性比静注免疫球蛋白提高约16倍,对动物的保护作用显著提高.结论 成功建立了EV71特免血浆的筛选方法及血浆筛选参考指标;所建立的高通量筛选方法操作简便,可用于研制EV71特异性免疫球蛋白的血浆筛选;制备的EV71特免球蛋白中和效价显著提高,对动物的保护作用明显增强,对于重症手足口病的防治可能具有重要意义。
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