利用大肠杆菌甲硫氨酸氨基肽酶去除重组人干扰素-α2bN端的起始甲硫氨酸

• 作 者: 王中安 宋礼华(指导教师)
• 机 构: 安徽医科大学生物化学与分子生物学教研室
• 出 处: 安徽医科大学学报
• 发表日期: 2012年11期
• 关键词: 甲硫氨酸氨基肽酶 干扰素-仅2b N端甲硫氨酸 基因表达 大肠杆菌

摘要目的获取大肠杆菌甲硫氨酸氨基肽酶（re-MAP）基因，构建重组大肠杆菌甲硫氨酸氨基肽酶的原核高表达载体pACYCDuet-1-MAP，利用大肠杆菌BL21作为宿主菌进行原核表达，并利用表达的reMAP切除重组人干扰素-α2b（rhlFN-α2b）N末端的初始甲硫氨酸。方法提取大肠杆菌BIS21基因组作为模板，用PCR方法扩增得到大肠杆菌MAP基因，并克隆到载体质粒pGEM-Tzf（-）中，将重组质粒pGEM-7zf（-）-MAP转化感受态大肠杆菌DH5α，蓝-白斑筛选及测序验证正确后，将reMAP基因