【摘 要】
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目的:观察黄芪桂枝五物汤中皂苷对机体免疫功能抑制的影响。方法:选取3~7周龄,清洁级昆明种小鼠,体质量(18±4)g,雌雄各半,取小鼠8只,雌雄各4只,脱颈处死,取脾脏,放入细胞筛
【机 构】
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唐山市第九医院,唐山市第四医院,河北联合大学
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目的:观察黄芪桂枝五物汤中皂苷对机体免疫功能抑制的影响。方法:选取3~7周龄,清洁级昆明种小鼠,体质量(18±4)g,雌雄各半,取小鼠8只,雌雄各4只,脱颈处死,取脾脏,放入细胞筛中,用玻璃注射器内塞在3 m L PBS中研磨脾脏,离心混悬液,沉淀物中加2 m L蒸馏水充分破碎混悬液中红细胞,约半分钟后加入1.8%氯化钠溶液2 m L,离心,磷酸缓冲液洗涤细胞,计数,调浓度为1.0×106·m L-1。在细胞培养板中,实验组加入100μL细胞悬液,从黄芪桂枝五物汤中提取其有效成分皂苷,作用于小鼠脾细胞,取皂苷溶液10μL,按设计浓度分别进行实验,对照组加10μL缓冲液。采用血球计数板计数细胞数以判断其增殖活性,酶联免疫吸附试验(ELISA)测细胞因子(IL-2,IFN-γ)含量,流式细胞仪(FCM)检测细胞表型变化情况。结果:实验组淋巴细胞增殖活性优于对照组(P<0.05);实验组IL-2、IFN-γ浓度优于对照组,且随皂苷浓度的增加而降低,在一定浓度范围内成剂量依赖关系;细胞表型分析显示,皂苷既能抑制T淋巴细胞增殖,也能抑制B淋巴细胞增殖和细胞因子IL-2、IFN-γ的分泌。结论:黄芪桂枝五物汤中皂苷能抑制T淋巴细胞增殖、B淋巴细胞增殖和细胞因子分泌,改善IL-2、IFN-γ浓度,且随皂苷浓度的增加而降低,在一定浓度范围内成剂量依赖关系。
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