【摘 要】
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目的 建立分离培养大鼠真皮来源多能干细胞(SKPs)的方法并探讨其生物学特性.方法 0.25%中性蛋白酶(protease)选择性的消化表皮与真皮的细胞连接,剥离真皮,采用0.25%的胰蛋白
【机 构】
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南昌大学第一附属医院泌尿外科研究所,南昌大学第一附属医院烧伤中心
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目的 建立分离培养大鼠真皮来源多能干细胞(SKPs)的方法并探讨其生物学特性.方法 0.25%中性蛋白酶(protease)选择性的消化表皮与真皮的细胞连接,剥离真皮,采用0.25%的胰蛋白酶消化真皮层细胞于超低黏附培养板中进行悬浮无血清培养,机械法传代,免疫荧光染色法检测细胞表面分子的表达,体外诱导其向脂肪细胞分化,研究其多分化潜能.结果 体外培养2～3 d后真皮多能干细胞聚集成球悬浮生长,培养4代后去除生长因子后并添加血清培养,细胞帖壁生长,呈长梭形成纤维样,免疫荧光染色显示,体外培养的真皮多能干细胞可表达CD29和Nestin,不表达CD34与vimentin.体外诱导实验结果显示体外培养的真皮多能干细胞能够被诱导成脂肪细胞,油红染色阳性.结论 采用悬浮培养方法可成功分离培养大鼠真皮多能干细胞,培养的细胞可表达神经干细胞标志并具有多分化潜能.
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