H5N1和H9N2亚型禽流感病毒HA基因的原核表达

• 作 者: 黄文科 林宝珍 罗琴芳 牛学锋 郭霄峰
• 机 构: 华南农业大学兽医学院
• 出 处: 华南农业大学学报
• 发表日期: 2008年2期
• 关键词: 禽流感病毒 HA基因 基因克隆 原核表达 avian influenza virus HA gene gene cloning prokaryotic
• 基金项目: 国家自然科学基金（30270987,30440010）,广东省自然科基金（020996）

采用自行设计的引物，通过PCR的方法，分别从pMD-HA5和pMD-HA9中成功扩增出AIV0025（H5N1）株和KMⅢ（H9N2）株的血凝素（hemagglutinin，HA）基因，然后分别亚克隆到pET-32a（＋）、pET-28a（＋）表达载体中，构建并筛选出阳性重组子，分别标记为pET32-HA5、pET28-HA9．将阳性重组质粒转化进BL21（DE3）宿主菌中，通过改变IPTG浓度和诱导时间，使重组蛋白获得表达，并确定了最佳诱导条件为IPTG终浓度1．0mmol／L、诱导时间4—5h．经SD