【摘 要】
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目的: 对在恶性黑素瘤(MM)组织中表达率极高并具有强免疫原性的新型睾丸肿瘤(C/T)抗原TAG1表位的HLA-A2限制性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)表位进行预测,并表达、纯化所预测表位与
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目的: 对在恶性黑素瘤(MM)组织中表达率极高并具有强免疫原性的新型睾丸肿瘤(C/T)抗原TAG1表位的HLA-A2限制性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)表位进行预测,并表达、纯化所预测表位与热休克蛋白70(Hsp70)融合蛋白,为特异性主动免疫治疗MM打下物质基础. 方法: 利用SYFPEITHI 法和多项式方案结合预测TAG1的HLA-A2限制性CTL表位,并将预测所得表位基因片断双串连后进行生物合成,克隆入带有GST标签并含Hsp70基因的原核表达载体,在IPTG诱导表达后,用GST蛋白纯化系统纯化. 结果: 预测并得到了三个TAG1的HLA-A2限制性表位,成功地构建了表位与Hsp70的原核表达质粒(PGEX-bw-HSP70);表达和纯化得到了三个表位与Hsp70的可溶性融合蛋白. 结论: 成功获得三个预测表位与Hsp70的融合蛋白,为进一步研究其免疫功能、研制TAG1对MM的特异性治疗肽疫苗奠定了基础.
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