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目的 分析2012-2019年浙江省杭州市及其周边县市5岁以下儿童病毒性腹泻的病原谱和流行病学特征,为病毒性腹泻防控提供参考依据.方法 2012-2019年收集浙江大学医学院附属儿童医院门急诊和肠道门诊5岁以下腹泻患儿的粪便标本,采用实时荧光定量PCR方法检测诺如病毒(NV)、轮状病毒(RV)、札如病毒(SAV)、肠道腺病毒(EADV)和星状病毒(ASV)的核酸.采用SPSS 19.0软件分析病原检出结果.结果 共收集1 350份标本,阳性标本594份,总检出率为44.00％.阳性病例以单病毒感染为主(84.51％,502/594),双重和三重感染分别占14.31％和1.18％,双重感染以NV和RV为主(54.12％,46/85).NV检出率最高,为23.41％,其次为RV(19.11％),SAV、EADV和ASV的检出率均＜5％(分别为4.22％、2.96％、1.63％).不同月龄组腹泻患儿间病毒核酸检出率差异有统计学意义(x2=256.140,P＜0.001),12～月龄组患儿的检出率最高,为73.77％(239/324),0～月龄组最低,为17.18％(73/425).各病毒在不同月龄组患儿间的检出率差异均有统计学意义.病毒总检出率的季节性差异有统计学意义(x2=188.495,P＜0.001),冬季(12月至次年2月)检出率最高,为70.31％ (225/320).NV、RV和SAV在不同季节的检出率差异有统计学意义(x2=90.284,P＜0.001;x2=188.068,P＜0.001;x2=29.066,P＜0.001),NV在秋季(9-11月)的检出率最高,RV和SAV均冬季检出率最高.2012-2019年各年度检出率在奇数年份高于前一偶数年份,总体呈上升趋势(趋势x2=13.532,P＜0.001).NV和ASV的检出率年度变化呈上升趋势(趋势x2=23.636,P＜0.001;趋势x2=18.073,P=0.003).RV、SAV、EADV的检出率年度变化趋势不规则(趋势x2=3.173,P=0.075;趋势x2=1.803,P=0.179;趋势x2=0.007,P=0.932).结论 5岁以下儿童病毒性腹泻主要病原为NV和RV,秋冬季为高发期,12～35月龄为高发年龄段,需在秋冬季加强病毒性腹泻的防控.