【摘 要】
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目的构建人颗粒溶素（granulysin,GNLY）质粒并在大肠杆菌中表达,纯化得到9kD目的蛋白片段,免疫新西兰大白兔制备兔抗颗粒溶素多克隆抗体。方法采用RT-PCR的方法获得编码人颗粒溶
【机 构】
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第二军医大学长征医院（全军临床免疫中心）实验诊断科
【基金项目】
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国家自然科学基金（30471616）、上海市重大科技攻关基金（04DZ19116）、上海市重点科研支撑条件项目（051409012）和上海市重点基础研究项目05JC14052）上海市青年科技启明星计划（QMX01423）.
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目的构建人颗粒溶素（granulysin,GNLY）质粒并在大肠杆菌中表达,纯化得到9kD目的蛋白片段,免疫新西兰大白兔制备兔抗颗粒溶素多克隆抗体。方法采用RT-PCR的方法获得编码人颗粒溶素的cDNA序列,将测序正确的片段克隆入pET-28a（＋）,构建pET28a（＋）-GNLY表达载体。在大肠杆菌BL21（DE3）plysS中IPTG诱导下表达6×His-融合蛋白,纯化后免疫新西兰兔,制备兔抗人颗粒溶素血清,以Western Blotting和ELISA方法分析其特异性和效价。结果6
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