新型抗菌蛋白内溶素在大肠杆菌中的融合表达与纯化

• 作 者: 李佳 刘伟 王华 严成其 王欣 陈剑平
• 机 构: 浙江师范大学化学与生命科学学院,浙江省农业科学院病毒学与生物技术研究所,浙江省农业科学院作物与核技术利用研究所,浙江省农业科学院病毒学与生物技术研究所
• 出 处: 浙江农业学报
• 发表日期: 2014年2期
• 关键词: 内溶素 大肠杆菌 融合表达 纯化
• 基金项目: 973子课题项目(2012CB721006);国际科技合作项目(2008DFA32080)

抗菌蛋白E17G是一种通过基因改造获得的高效杀菌蛋白。为高效表达抗菌蛋白E17G并减少E17G的抗菌活性对大肠杆菌宿主菌的致死作用，将E17G基因克隆到原核表达载体pGEX-6P-1中，构建的重组原核表达载体pGEX-6P-1-E17G在低温下经IPTG诱导，E17G蛋白在大肠杆菌BL21中以GST-E17G融合蛋白的形式表达，采用GST亲和层析纯化和收集GST-E17G融合蛋白。 SDS-PAGE和Western blotting检测结果显示，GST-E17G能在大肠杆菌中正确表达，为进一步研究E17G