重组原核表达质粒pTrc99A—ureB/hlyE的构建和表达

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目的构建表达幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)尿素酶B亚单位(ureB)基因与大肠杆菌K-12株hlyE基因融合表达的原核表达质粒pTrc99A-hlyE.并表达.方法用PCR扩增hlyE基因,经酶切连接反应将其克隆入重组原核表达质粒并测序,与GenBank中的核酸和蛋白序列进行BLAST分析,重组的阳性克隆经IPTG诱导培养,SE-PAGE电泳进行表达分析,薄层扫描分析融合蛋白的含量.结果对重组质粒进行酶切和PCR检测,证明构建了携带hlyE及ureB基因的重组原核表达质粒pTr
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