体外定点突变技术构建人促红细胞生成素基因表达载体

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目的 构建人促红细胞生成素基因的真核表达载体并采用体外定点突变技术予以修正突变位点.方法 采用逆转录PCR方法从人肾组织克隆促红细胞生成素cDNA,亚克隆到真核表达载体并测序,采用体外定点突变技术将3个碱基突变位点予以纠正.结果 测序结果证实3个碱基突变位点得以纠正,得到序列完全正确的人红细胞生成素cDNA.结论 成功构建了人促红细胞生成素基因的真核表达载体,结合体外定点突变技术修复PCR产物中的突变是得到序列正确的目的 基因的较理想方法.
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