薯莨抗H2O2致H9c2细胞氧化损伤作用的有效部位筛选研究

• 作 者: 刘春花 陆定艳 游景瑞 王爱民 兰燕宇 王永林
• 机 构: 贵州医科大学民族药与中药开发应用教育部工程研究中心/省部共建药用植物功效与利用国家重点实验室; 贵州医科大学贵州省药物制剂重点实验室; 贵州医科大学药学院; 贵州医科大学
• 出 处: 中药材
• 发表日期: 2004年期
• 关键词: 薯莨有效部位 过氧化氢 H9c2心肌细胞 氧化应激
• 基金项目: 国家自然科学基金(U1812403,81803700);贵州省教育厅青年科技人才成长项目(黔教合KY字[2017]156);中央引导地方科技专项项目(黔科中引地[2018]4006);贵州省科技计划项目(黔科合平台人才[2016]5613,黔科合平台人才[2016]5677,黔科合基础[2018]1128,黔科合平台人才[2017]5718);贵州省中医药管理局中医药、民族医药科学技术研究项目

目的:利用H₂O₂诱导的H9c2细胞氧化损伤模型,来筛选薯莨抗氧化损伤的主要活性部位。方法:利用不同浓度的H₂O₂诱导H9c2细胞氧化损伤,选择最佳造模浓度;以不同浓度（100、200、400 mg/L）的薯莨提取物不同部位样品孵育H9c2细胞24 h后,再以H₂O₂进行氧化损伤模型处理,采用MST法检测H9c2细胞的活力,以化学试剂盒的方法检测细胞培养上清液中乳酸脱氢酶（LDH）水平、细胞中活性氧（ROS）、丙二醛（MDA）水平和超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）活性,评价薯莨提取物不同部位抗氧化损伤的作用,筛选其主要抗氧化活性有效部位。结果:H₂O₂浓度为600μmol/L时可使其存活率下降至50%（P<0.001）左右,可用该浓度的H₂O₂建立氧化应激损伤模型。与模型组比较,薯莨总提物和水洗脱物能显著提高H₂O₂诱导的H9c2细胞活力（P<0.01）,并能明显改善细胞形态;薯莨水洗脱物高浓度组LDH泄漏量显著低于模型组;与模型组比较,薯莨水洗脱物组细胞中ROS和MDA水平显著降低,SOD、CAT活性显著升高,而薯莨60%、95%乙醇洗脱物。结论:在本研究的浓度下,薯莨水洗脱物具有显著的抗H₂O₂致H9c2细胞氧化损伤作用,是薯莨抗H9c2细胞氧化损伤的主要活性部位。