人疱疹病毒8型K12基因在大肠杆菌中的克隆和表达

• 作 者: 朱建中 卢春
• 机 构: 南京医科大学基础医学院病原生物系
• 出 处: 南京医科大学学报：自然科学版
• 发表日期: 2002年4期
• 关键词: 人疱疹病毒8型 K12基因 原核表达 human herpesvirus (HHV8) K12 gene prokaryotic expression
• 基金项目: 国家自然科学基金，江苏省教育厅科研项目，南京医科大学校科研和教改项目

目的:将人疱疹病毒8型(HHV-8)K12基因在大肠杆菌中进行融合表达.方法:设计一对PCR引物,在引物的5′端分别引入EcoRI和XhoI酶切位点,用此引物从质粒pCR-K12中扩增出HHV-8的K12基因,PCR产物经双酶切后按正确阅读框连接到原核表达载体pGEX-6p-1上相应酶切位点,并转化BL21感受态细胞.结果:重组菌经异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导后,菌体SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)显示有一个大小为33ku的融合表达蛋白产生.结论:初步表明K12基因在大肠杆菌中获得正