【摘 要】
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目的:建立检测鼠类肉瘤滤过性毒菌致癌同源体B1(BRAF)基因V600E突变的荧光聚合酶链式反应(PCR)方法,为黑色素瘤的药物靶向治疗提供新的基因检测方法。方法:根据BRAF基因序列V
【机 构】
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中国食品药品检定研究院,中国科学院北京基因组研究所,珍奥集团股份有限公司,
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目的:建立检测鼠类肉瘤滤过性毒菌致癌同源体B1(BRAF)基因V600E突变的荧光聚合酶链式反应(PCR)方法,为黑色素瘤的药物靶向治疗提供新的基因检测方法。方法:根据BRAF基因序列V600E位点区域设计特异性的引物和探针,建立该检测方法。检测BRAF基因V600E突变的黑色素瘤临床样本、BRAF基因V600E突变质粒和正常临床样本,评价方法的准确性、灵敏度和特异性。结果:BRAF基因V600E突变的黑色素瘤临床样本在V600E检测体系中具有特异性的扩增;检测灵敏度约为101拷贝/反应;正常临床样本在V600E检测体系中没有特异性的扩增,均是V600E突变阴性。结论:建立的方法可以用于检测黑色素瘤临床样本中的BRAF基因V600E突变。
OBJECTIVE: To establish a fluorescent polymerase chain reaction (PCR) method to detect the V600E mutation of the BRAF gene of murine sarcoid viral virulence, and to provide a new gene detection method for the drug targeted therapy of melanoma. Methods: According to the region of V600E locus of BRAF gene, specific primers and probes were designed to establish this method. The clinical samples of melanoma with V600E mutation in BRAF gene and the V600E mutation plasmid in BRAF gene and normal clinical samples were tested to evaluate the accuracy, sensitivity and specificity of the method. Results: The clinical manifestations of melanoma with V600E mutation in BRAF gene were detected in the V600E detection system. The detection sensitivity was about 101 copies / reaction. The normal clinical samples did not have any specific amplification in the V600E detection system. Both were V600E Mutation negative. Conclusion: The established method can be used to detect the BR600 V600E mutation in clinical samples of melanoma.
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