【摘 要】
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目的 探讨Ano1在TGF-β1诱导大鼠小肠隐窝上皮细胞(IEC6)上皮间质转分化(EMT)中的作用. 方法 TGF-β1组采用10 ng/ml TGF-β1刺激IEC6 72 h,以无血清培养为正常对照组,观察细
【机 构】
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空军军医大学第二附属医院消化内科,西安,710038
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目的 探讨Ano1在TGF-β1诱导大鼠小肠隐窝上皮细胞(IEC6)上皮间质转分化(EMT)中的作用. 方法 TGF-β1组采用10 ng/ml TGF-β1刺激IEC6 72 h,以无血清培养为正常对照组,观察细胞形态.RT-PCR法检测Ano1 mRNA水平,Western blot检测E-cadherin、Vimentin、Fribronectin、α-SMA及Ano1蛋白表达.应用慢病毒转染技术建立过表达Ano1细胞系(IEC6-Ano1),以空载体为对照组(IEC6-NC).再次利用10 ng/ml TGF-β1刺激IEC6-Ano1 72 h后建立IEC6-Ano1+ TGF-β1组,观察该组与正常对照组、IEC6-NC组的细胞形态,Western blot检测E-cadherin、Vimentin、Fribronectin、α-SMA表达水平.结果 与正常对照组相比,TGF-β1组IEC6细胞形态出现间质化改变,E-cadherin表达降低,Vimentin、Fribronectin、α-SMA蛋白表达升高(P＜0.001),Ano1 mRNA及蛋白表达降低(P＜0.05).与正常对照组及IEC6-NC组比较,IEC6-Ano1+ TGF-β1组细胞形态无明显改变,E-cadherin、Vimentin、Fribronectin及α-SMA蛋白表达水平无统计学差异. 结论 研究显示Ano1可通过抑制TGF-β1介导的IEC6细胞EMT过程,从而缓解肠道纤维化.
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