【摘 要】
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目的 检测先天性弓形虫感染胎鼠脑组织差异蛋白并分析其功能,为先天性弓形虫病的发生机制研究提供理论基础. 方法 选取9～10周龄BALB/c孕鼠20只,随机分为正常对照组和感染组,每
【机 构】
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山西医科大学医学寄生虫学教研室,山西太原,030001;山西华大新元生物科技有限公司
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目的 检测先天性弓形虫感染胎鼠脑组织差异蛋白并分析其功能,为先天性弓形虫病的发生机制研究提供理论基础. 方法 选取9～10周龄BALB/c孕鼠20只,随机分为正常对照组和感染组,每组10只.于妊娠第10 d,感染组每只小鼠腹腔注射经胰酶消化的弓形虫速殖子40个/0.2 ml;正常对照组腹腔注射无菌PBS溶液0.2 ml/只(0.01mol/L,pH 7.3).于妊娠第20 d处死孕鼠,取胎鼠脑组织,采用Bradford法测定蛋白含量;采用双向凝胶电泳分离胎鼠脑组织蛋白,运用ImageMaster 2D软件分析差异蛋白,采用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI TOF MS)分析差异蛋白点的肽指纹谱(PMF),运用Mascot软件在SWISS-PROT数据库中对差异蛋白进行比较与评判,运用David软件对差异蛋白进行生物信息学分析. 结果 两组胎鼠脑组织均分离出约500个蛋白点,经蛋白质胶图分析鉴定出显著差异蛋白点15个,分子质量单位(Mr)多分布于(8～48)×10 3之间,等电点(pI)在3～10之间.在弓形虫感染胎鼠脑组织低表达的15个差异蛋白点经过鉴定和功能分析,主要是以下6种:结蛋白,肌动蛋白,血清白蛋白,葡萄糖凋节蛋白,蛋白质二硫键异构酶和膜联蛋白. 结论 弓形虫感染胎鼠脑组织中有6种差异蛋白低表达,弓形虫可能通过降低这些蛋白的表达量来影响胎鼠脑组织的正常结构、物质转运和调节功能等,从而引发先天性弓形虫脑病.
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