凡纳滨对虾感染致急性肝胰腺坏死病副溶血弧菌（VpAHPND）的定量分析

• 作 者: 陈蒙蒙 董宣 邱亮 万晓媛 谢国驷 黄倢
• 机 构: 青岛海洋科学与技术试点国家实验室海洋渔业科学与食物产出过程功能实验室农业农村部海水养殖病害防治重点实验室青岛市海水养殖流行病学与生物安保重点实验室中国水产科学研究院黄海水产研究所,上海海洋大学水产与生
• 出 处: 渔业科学进展
• 发表日期: 2018年04期
• 关键词: 致急性肝胰腺坏死病 副溶血弧菌 浸浴感染 凡纳滨对虾 qPCR 时间进程
• 基金项目: 中国东盟海上合作基金项目（2016-2018）, 青岛海洋科学与技术试点国家实验室主任基金（QNLM201706）, 中国水产科学研究院中央级公益性科研院所基本科研业务费专项资金（2017HY-ZD10）、中国水产科学研究院黄海水产研究所中央级公益性科研院所基本科研业务费专项资金（20603022016012）, 现代农业产业技术体系（CARS-47）共同资助

对虾急性肝胰腺坏死病（Acute hepatopancreatic necrosis disease,AHPND）是由致AHPND副溶血弧菌（AHPND-causing Vibrio parahaemolyticus,VpAHPND）携带的pVA1-like质粒所表达的PirA^Vp和PirB^Vp毒力蛋白对对虾肝胰腺的急性毒性所致。本研究用2.19×10⁵ CFU/ml VpAHPND分离株20130629002S01对凡纳滨对虾（Litopenaeus vannamei）进行浸泡感染,于感染后2⁹ d采集对虾的肝胰腺、鳃、肠道、肌肉组织,采用实时荧光定量PCR方法,检测各组织中的pir AVp拷贝数。结果显示,感染后凡纳滨对虾各组织均能检测到pirA^Vp,其中,肝胰腺在感染后第4天达到峰值,为8.71×10⁴ copies/mg,而鳃、肌肉、肠道分别在第3、4、5天达到峰值,分别为9.08×10³、2.59×10⁴、5.76×10⁴ copies/mg。早期感染鳃组织中先出现Vp_AHPND的富集,在高死亡发生期,Vp_AHPND数量在肝胰腺和肠道出现高峰,在死亡数量逐渐下降的后期,各组织的Vp_AHPND均快速下降,肠道、肝胰腺和肌肉中的Vp_AHPND水平趋于接近。对虾肝胰腺组织病理切片显示,同一时间有临床症状的病虾和濒死对虾相比,濒死对虾表现出更严重的AHPND病理特征,且二者的组织病理特征均随着感染时间的延长变得更为严重,但检测到的Vp_AHPND数量呈下降趋势。研究表明,在Vp_AHPND感染过程中,组织中的pirA^Vp基因数量不能代表对虾的发病程度,发病程度及组织病理严重的AHPND样品中Vp_AHPND的数量不一定处于高水平状态。