微小RNA-125b在结肠癌组织中的表达及其与肿瘤细胞耐药性的关系

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目的 探讨微小RNA(miRNA,miR)-125b在结肠癌组织中表达及与肿瘤细胞耐药性的关系.方法 收集63例择期行手术治疗的结肠癌组织及癌旁组织标本,培养及转染人结肠癌细胞株HCT8和耐长春新碱结肠癌细胞株HCT8/VCR,根据转染情况将HCT8细胞分成3组:转染miR-125b抑制物组、转染miR-阴性对照组和未转染组,将HCT8/VCR细胞分成3组:转染miR-125b模拟物组、转染miR-阴性对照组和未转染组,利用细胞计数试剂盒(CCK-8)法对细胞存活情况进行检测,利用实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测miR-125b在结肠癌、癌旁组织及细胞中表达,利用Western blot检测细胞中B细胞淋巴瘤/白血病-2(bcl-2)蛋白及P-糖蛋白(P-gp)表达.结果 结肠癌组织中miR-125b相对表达量(3.76±0.93)显著低于癌旁组织(5.18±1.45),差异有统计学意义(P<0.01),miR-125b在结肠癌组织中表达与淋巴结转移、远处转移和TNM分期有关(P<0.05);miR-125b在HCT8细胞中相对表达量显著高于HCT8/VCR细胞,差异有统计学意义(P<0.05),Western blot结果显示,bcl-2蛋白和P-gp蛋白在HCT8细胞中表达量显著低于HCT8/VCR细胞,差异均有统计学意义(P<0.05);对HCT8细胞转染miR-125b抑制物后,Western blot结果显示,bcl-2蛋白在miR-125b抑制物组HCT8细胞中表达量显著高于阴性对照组和空白对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);CCK-8结果显示,miR-125b抑制物组HCT8细胞在各浓度下存活率均高于阴性对照组和空白对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);对HCT8/VCR细胞转染miR-125b模拟物后,Western blot结果显示,bcl-2蛋白在miR-125b模拟物组HCT8/VCR细胞中表达量显著低于阴性对照组和空白对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);CCK-8结果显示,miR-125b模拟组HCT8/VCR细胞存活率显著低于阴性对照组和空白对照组,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 miR-125b在结肠癌组织中呈低表达,与肿瘤细胞耐药性关系密切,可能是通过bcl-2蛋白调控的细胞凋亡路径实现.
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