【摘 要】
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采用L型大泡通气系统机械搅拌式生物反应器培养293T悬浮细胞和规模化生产慢病毒载体,通过4种方法驯化293T悬浮细胞,对其慢病毒包装能力进行验证,并建立种子扩增链,在5.5 L工
【机 构】
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天津科技大学生物工程学院,天津市工业微生物重点实验室,天津 300457;武汉科技大学生命科学与健康学院,湖北 武汉 430065
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采用L型大泡通气系统机械搅拌式生物反应器培养293T悬浮细胞和规模化生产慢病毒载体,通过4种方法驯化293T悬浮细胞,对其慢病毒包装能力进行验证,并建立种子扩增链,在5.5 L工作体积生物反应器中绘制悬浮细胞生长曲线和包装慢病毒.结果表明,采用体积分数50%的293 CD05 Medium无血清基础培养基和体积分数50%的SMM293-TⅡ培养基可以快速驯化293T细胞,成功得到野生型且具有慢病毒包装能力的悬浮细胞系.悬浮细胞在机械搅拌式生物反应器培养,2 d细胞密度可达1.5×106个·mL-1.添加质粒复合物和补料培养基,培养4 d可以收获6.5×107 TU·mL-1滴度的慢病毒粗产品,相比细胞工厂的滴度提高34倍.
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