利用酵母双杂交技术筛选人PROKR2蛋白C端相互作用蛋白

• 作 者: 周晓涛 周文涛 夏开德 刘化蝶 彭震 赵云娟 迪丽娜尔
  
• 机 构: 新疆医科大学基础医学院免疫学教研室,新疆医科大学第五附属医院,贵州省妇幼保健医院,中南大学医学遗传学国家重点实验室
• 出 处: 生物技术通讯
• 发表日期: 2018年1期
• 关键词: 人前动力蛋白受体2(hPROKR2) SNAPIN 相互作用蛋白 酵母双杂交
• 基金项目: 新疆维吾尔自治区自然科学基金（2015211C034）

目的 利用酵母双杂交技术从人cDNA文库中筛选人前动力蛋白受体2 （hPROKR2） C端相互作用蛋白.方法： 复苏酵母菌Y2HGold-hPROKR2-C, 与人cDNA文库杂交, 计算杂交效率; 筛选相互作用克隆并测序, 寻找hPROKR2蛋白C端相互作用蛋白; 通过在DDO/X、 QDO/A/X平皿上划线, 对筛选到的人cDNA文库质粒的自活性进行验证; 采用GSTpulldown进一步验证两者之间的相互作用.结果： 酵母双杂交实验的杂交融合效率为1.375×108; 在人cDNA文库中筛