【摘 要】
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目的:探讨不同条件对免疫沉淀方法分离纯化膜蛋白时的影响.方法:分别应用磷酸盐缓冲液(PBS)和溶膜缓冲液(合去垢剂)作为反应系统,单克隆抗体PD4与胃癌细胞系MGC803细胞膜溶液
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目的:探讨不同条件对免疫沉淀方法分离纯化膜蛋白时的影响.方法:分别应用磷酸盐缓冲液(PBS)和溶膜缓冲液(合去垢剂)作为反应系统,单克隆抗体PD4与胃癌细胞系MGC803细胞膜溶液进行免疫沉淀反应以获得PD4相关抗原,用Western blot检测膜蛋白的得量.结果:分离纯化PD4相关抗原时,用CNBr-Sepharose 4B-PD4进行免疫沉淀效果优于Protein A Sepharose 4B;溶膜缓冲液作为反应系统效果优于磷酸盐缓冲液.结论:免疫沉淀纯化膜蛋白时,应用抗体直接交联于Sepharose 4B和溶膜缓冲液作为反应系统效果更佳.
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