【摘 要】
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目的探讨miR-143-3p在高糖刺激的人腹膜间皮细胞(HPMC)转分化中的作用及相关机制。方法将永生化的HPMC给予50mmol/L高糖刺激72h后,反转录PCR及Westernblot法检测miR-143-3p、
【机 构】
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第四军医大学西京医院肾脏内科; 第四军医大学西京消化病医院;
【基金项目】
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国家自然科学基金(81270768,81270849);陕西省科技攻关项目(2012K16-08-05)
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目的探讨miR-143-3p在高糖刺激的人腹膜间皮细胞(HPMC)转分化中的作用及相关机制。方法将永生化的HPMC给予50mmol/L高糖刺激72h后,反转录PCR及Westernblot法检测miR-143-3p、血清反应因子(SRF)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、E-钙黏素(E-cadherin)及Snail的mRNA和蛋白表达变化;利用miR-143-3p的模拟物、模拟物阴性对照、抑制剂及抑制剂阴性对照;pcDNA3.1空载体与pcDNA3.1-SRF质粒;SRF-siRNA和阴性对照分别转染高糖刺激72h后的HPMC,反转录PCR及Westernblot法检测miR-143-3p、SRF、α-SMA、E-cadherin及Snail的mRNA和蛋白表达水平。结果反转录PCR及Westernblot法检测结果显示,高糖刺激HPMC72h后,miR-143-3p、SRF、α-SMA及Snail表达增加,而E-cadherin表达下降;上调miR-143-3p的表达后,SRF、α-SMA及Snail表达增加,而E-cadherin表达降低。下调miR-143-3p的表达后,SRF、α-SMA及Snail表达减少,而E-cadherin表达增加。利用pcDNA3.1-SRF质粒上调SRF表达,则miR-143-3p、α-SMA及Snail表达增加,而E-cadherin表达下调;SRF-siRNA沉默SRF后,miR-143-3p、α-SMA及Snail表达下调,而E-cadherin表达增加。结论SRF/miR-143-3p信号通路轴参与了高糖刺激所引起的人腹膜间皮细胞的转分化过程,其机制可能是通过SRF上调miR-143-3p的表达,间接参与人腹膜间皮细胞的转分化。
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