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评价内毒素攻击大鼠肺泡巨噬细胞时1-磷酯酰肌醇3-激酶/丝氨酸苏氨酸激酶(PI3K/Akt)信号通路在一氧化碳(CO)上调线粒体融合蛋白-1(Mfn1)表达中的作用。
方法传代培养12～20周龄大鼠肺泡巨噬细胞，以密度4×104个/ml接种于96孔板，培养24 h后，采用随机数字法分为4组(n＝10)：对照组(C组)、内毒素组(L组)、LPS＋一氧化碳释放剂CORM-2组(L＋C组)和LPS＋CORM-2＋PI3K抑制剂LY294002组(L＋C＋LY组)。C组正常培养，L组、L＋C组和L＋C＋LY组均给予10 μg/ml LPS刺激肺泡巨噬细胞，制备内毒素攻击模型；L＋C组于LPS刺激前1 h给予CORM-2 100 μmol；L＋C＋LY组于LPS刺激前1.5、1.0 h分别给予抑制剂LY294002 20 μg、CORM-2 100 μmol；每组细胞处理完毕后继续孵育24 h。采用ELISA法测定细胞上清液TNF-α和IL-10的浓度，采用RT-PCR和Western blot法测定细胞PI3K、磷酸化Akt(p-Akt)和Mfn1的表达。
结果与C组比较，L组、L＋C组和L＋C＋LY组TNF-α浓度升高，IL-10浓度下降(P<0.05)；与L组比较，L＋C组IL-10浓度升高，TNF-α浓度下降，PI3K、p-Akt、Mfn1表达上调(P<0.05)；与L＋C组比较，L＋C＋LY组IL-10浓度下降，TNF-α浓度升高，PI3K、p-Akt、Mfn1表达下调(P<0.05)。
结论内毒素攻击大鼠肺泡巨噬细胞时，PI3K/Akt信号通路的激活参与了CO上调Mfn1表达的过程。