【摘 要】
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利用Stratagene公司HybriZAP-2.1建库试剂盒构建了经有丝分裂原刺激的鲤鱼外周血白细胞cDNA文库.采取健康鲤鱼外周血,分离白细胞,经LPS、PHA和ConA分组作用不同时间后,分别提
【基金项目】
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国家自然科学基金资助项目 ( 3 0 2 0 0 2 10 )
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利用Stratagene公司HybriZAP-2.1建库试剂盒构建了经有丝分裂原刺激的鲤鱼外周血白细胞cDNA文库.采取健康鲤鱼外周血,分离白细胞,经LPS、PHA和ConA分组作用不同时间后,分别提取总RNA,将各组样品混合后,以Oligo(dT)纤维素柱分离纯化mRNA,经逆转录合成cDNA的第1链和第2链,与EcoRI接头连接,酶切后,用CHR0MA SPIN-400柱离心层析纯化,与HybriZAP-2.1载体连接,体外包装后转染E.coli XLI-Blue宿主菌,进行滴度测试和文库扩增.结果构
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