探讨低硒条件下T-2毒素中毒大鼠关节软骨细胞死亡形式。
方法选择32只雄性健康SD大鼠,按体质量采用随机数字表法分为2组,每组16只,分别给予硒含量为101.5、1.1 μg/kg的常规和低硒饮食。30 d后,将常规饲料组分为对照组和T-2组,低硒饲料组分为低硒组和低硒+ T-2毒素组,每组8只大鼠。T-2毒素组和低硒+ T-2毒素组每日给予T-2毒素(100 μg/kg)灌胃饲养。30 d后处死大鼠,取左侧膝关节,HE和番红O固绿染色,光镜下观察大鼠膝关节软骨病理学改变;原位缺口末端(TUNEL)法检测软骨细胞凋亡,计算凋亡指数;免疫组织化学法检测大鼠关节软骨细胞活化caspase-3和RIP3的表达。
结果光镜下,低硒+ T-2毒素组关节软骨深层可见片状坏死,软骨细胞死亡变为"红色影子"细胞或红染的无结构区域。TUNEL染色,低硒+ T-2组与对照组、低硒组、T-2毒素组比较,表、中层关节软骨细胞凋亡指数差异有统计学意义[(7.47 ± 0.34)%比(4.68 ± 0.54)%、(2.67 ± 0.64)%、(2.56 ± 0.54)%;(72.06 ± 6.15)%比(16.10 ± 3.00)%、(19.57 ± 3.49)%、(19.33 ± 5.19)%,P均< 0.05];表、中层活化caspase-3阳性率差异有统计学意义[(4.75 ± 0.67)%比(1.24 ± 0.25)%、(0.00 ± 0.00)%、(0.00 ± 0.00)%;(51.13 ± 4.18)%比(10.97 ± 3.01)%、(15.36 ± 4.37)%、(15.23 ± 3.13)%,P均< 0.05];中层RIP3阳性率差异有统计学意义[(25.91 ± 13.39)%比(1.59 ± 1.14)%、(4.32 ± 2.91)%、(7.50 ± 5.00)%,P均< 0.05]。4组大鼠关节软骨深层细胞凋亡指数及活化caspase-3、RIP3表达水平比较,差异无统计学意义(P均> 0.05)。
结论低硒条件下T-2毒素中毒大鼠关节软骨中层软骨细胞的死亡形式为坏死性凋亡与凋亡共同存在。