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高密度脂蛋白受体在胆固醇逆向运输中起重要作用,并且其可以做为动脉粥样硬化的新型治疗靶点.为了构建以竞争性受体-配体相互作用为基础的体外高通量药物筛选模型,在甲醇酵母中表达了高密度脂蛋白受体胞外结构域.应用RT-PCR方法从人肝癌Bel-7402总RNA中扩增了编码高密度脂蛋白受体胞外结构域的基因片段,此基因片段经测序证实后亚克隆至甲醇酵母分泌表达质粒pPIC9K中.经测序验证读码框正确后将重组质粒电转至Pichia pastoris GS115中.应用PCR方法确定目的基因的整合和Mut+表型.重组菌株用