【摘 要】
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目的 观察小于扰RNA(siRNA)对大鼠骨髓来源不成熟树突状细胞(iDC) MyD88基因表达的抑制作用.方法 采用粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子体外培养大鼠骨髓来源iDC;设计并合成针对M
【机 构】
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南京医科大学附属常州第二人民医院普外科,南京医科大学附属常州第二人民医院中心实验室,南京医科大学第一附属医院胃肠外科
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目的 观察小于扰RNA(siRNA)对大鼠骨髓来源不成熟树突状细胞(iDC) MyD88基因表达的抑制作用.方法 采用粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子体外培养大鼠骨髓来源iDC;设计并合成针对MyD88基因的siRNA,阳离子脂质体作为转染介质；siRNA转染iDC 48 h后,分别检测iDC活力、转染效率、表面分子表达、吞噬能力、MyD88基因mRNA转录水平及蛋白表达.结果 培养6d后收集iDC.采用适当浓度siRNA(1 μg/500μl)和阳离子脂质体(3 μg/500μl)转染48h,转染iDC活力平均(98.50±1.04)％,转染效率平均(85.60±3.50)％,转染iDC表面分子与未转染iDC比较无显著差异,转染前后iDC吞噬能力无显著变化,MyD88基因mRNA转录水平和蛋白表达分别为内参的0.098±0.012和0.087±0.015.结论 化学合成MyD88-siRNA是诱导iDC MyD88基因沉默的一种有效、可行的方法.
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