【摘 要】
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目的 构建表达诺如病毒（norovirus,NoV）衣壳蛋白VP1和VP2基因的重组腺病毒疫苗，并检测其在小鼠体内的免疫原性。方法 以5型腺病毒为载体，制备表达NoV主要衣壳蛋白VP1以及同时表达VP1、VP2和3′UTR区的两种重组腺病毒载体，通过PCR和Western blot法对重组腺病毒进行体外鉴定。将两组重组腺病毒以108IU/只的剂量灌胃免疫BALB/c小鼠，共免疫2次，间隔3周。采用
【机 构】
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中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所
【基金项目】
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国家自然科学基金（21934005）；
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目的 构建表达诺如病毒（norovirus,NoV）衣壳蛋白VP1和VP2基因的重组腺病毒疫苗，并检测其在小鼠体内的免疫原性。方法 以5型腺病毒为载体，制备表达NoV主要衣壳蛋白VP1以及同时表达VP1、VP2和3′UTR区的两种重组腺病毒载体，通过PCR和Western blot法对重组腺病毒进行体外鉴定。将两组重组腺病毒以108IU/只的剂量灌胃免疫BALB/c小鼠，共免疫2次，间隔3周。采用ELISA和ELISPOT等方法检测两组重组腺病毒诱导的体液免疫、黏膜免疫和细胞免疫反应。结果 重组腺病毒pkAd5ES-VP1和pkAd5ES-VP1-2的病毒滴度分别为3.4×10~9和2.4×10~9IU/mL。两种重组腺病毒均能在真核细胞中高效表达外源基因。VP1+VP2+3′UTR区共表达的重组腺病毒在灌胃免疫时能有效提升小鼠粪便IgA、血清组织血型抗原（histo-blood group antigen,HBGA）阻断抗体水平以及脾脏IL-4分泌细胞的数量。结论 与单独表达VP1比较，VP1+VP2+3′UTR区共同表达的重组腺病毒疫苗具有更好的免疫原性。本研究为高效口服NoV疫苗的研发提供了参考。
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