结核分枝杆菌Rv1512基因的特异性和克隆表达

• 作 者: 曹廷明 贾红彦 杜凤娇 刘洋 刘忠泉 马玙 张宗德
• 机 构: 北京市结核病胸部肿瘤研究所,首都医科大学附属北京胸科医院
• 出 处: 临床肺科杂志
• 发表日期: 2011年12期
• 关键词: 结核分枝杆菌 Rv1512 特异性 重组蛋白质 Mycobacterium tuberculosis Rv1512 specificity recombinan
• 基金项目: 结核病诊断分子标识研究（项目编号：2008ZX10003-005）, 北京市卫生系统高层次卫生技术人才培养计划项目（编号：2009-3-51）

目的鉴定结核分枝杆菌Rv1512基因的特异性,克隆表达该基因并获得其重组蛋白。方法设计Rv1512基因的特异性引物,并鉴定其特异性。构建pET30a（＋）：Rv1512重组质粒,阳性克隆转化入大肠杆菌BL21。经Ni＋-NTA层析柱纯化融合蛋白,通过SDS-PAGE鉴定该蛋白及其纯度。结果结核分枝杆菌Rv1512基因的特异性被证实;经测序分析证实Rv1512原核表达质粒构建正确,SDS-PAGE结果显示在40 kD处呈现单一蛋白条带。结论结核分枝杆菌Rv1512基因具有较好的特异性;成功构建表达载体pET