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以灭活大肠杆菌（E．coli）O157为抗原免疫产蛋鸡获得抗E．coli O157卵黄抗体（IgY），建立了该抗体的间接酶联免疫吸附试验（ELISA）检测方法。并研究了包被温度和时间及不同卵黄前处理方法对ELISA检测的影响，所获得的最佳检测条件为：以浓度为10^8～10^9／mL的灭活E．coliO157，为抗原进行包被，4℃包被19h，水稀释法对卵黄进行前处理，然后检测其中的IgY效价。该方法简便可靠，适于对大肠杆菌特异性抗体IgY的动态检测和批量检测。