【摘 要】
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目的 探究姜黄素对酒精性肝损伤(ALD)大鼠细胞色素P4503A(CYP3A)的影响及其机制.方法 60只建模成功的ALD大鼠按随机数字表法分为模型组,姜黄素低、中、高剂量组(分别灌胃40、80、160 mg/kg姜黄素)及阳性对照组(腹腔注射200 mg/kg腺苷蛋氨酸),每组12只;对照组12只正常饲养,灌胃等体积生理盐水,连续6周.全自动生化分析仪检测血清中丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)和碱性磷酸酶(ALP)水平;苏木精-伊红(HE)染色观察肝脏形态变化;荧光定量聚合酶链反应(qP
【机 构】
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武汉职业技术学院生物工程学院 430074;湖北省肿瘤医院药学部
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目的 探究姜黄素对酒精性肝损伤(ALD)大鼠细胞色素P4503A(CYP3A)的影响及其机制.方法 60只建模成功的ALD大鼠按随机数字表法分为模型组,姜黄素低、中、高剂量组(分别灌胃40、80、160 mg/kg姜黄素)及阳性对照组(腹腔注射200 mg/kg腺苷蛋氨酸),每组12只;对照组12只正常饲养,灌胃等体积生理盐水,连续6周.全自动生化分析仪检测血清中丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)和碱性磷酸酶(ALP)水平;苏木精-伊红(HE)染色观察肝脏形态变化;荧光定量聚合酶链反应(qPCR)检测肝脏组织中孕烷X受体(PXR)、组成型雄甾烷受体(CAR)、CYP3A25 mRNA水平;Western blot检测肝脏组织中PXR、CAR蛋白水平.以大鼠原代肝细胞为研究对象,分别用0、100、200、300、400、500 mmol/L乙醇培养细胞,取细胞增殖抑制率约为50％时的乙醇浓度进行下一步实验;0、0.5、1.0、2.0、4.0、8.0、16.0μmol/L姜黄素培养细胞,取最适姜黄素浓度进行后续研究.实验分为对照组、乙醇组、姜黄素组、姜黄素+siRNA-NC组及姜黄素+siRNA-CYP3A25组.CCK-8检测细胞增殖情况;qPCR检测细胞中CYP3A25 mRNA水平;Western blot检测细胞中PXR、CAR蛋白水平.结果 动物实验:与对照组相比,模型组血清中ALT、AST、ALP水平升高(P<0.05);与模型组相比,姜黄素低剂量组血清中ALT、ALP水平降低,肝脏组织中PXR、CAR mRNA和蛋白,CYP3A25 mRNA水平升高(P<0.05),姜黄素中、高剂量组血清中ALT、AST、ALP水平降低,肝脏组织中PXR、CAR mRNA和蛋白,CYP3A25 mRNA水平升高(P<0.05);随着剂量升高,各指标逐渐恢复.细胞实验:与对照组相比,乙醇组细胞增殖抑制率升高(P<0.05),细胞中PXR、CAR蛋白水平降低(P<0.05);与乙醇组相比,姜黄素组细胞增殖抑制率降低(P<0.05),细胞中CYP3A25 mRNA,PXR、CAR蛋白水平升高(P<0.05);与姜黄素组相比,姜黄素+siRNA-CYP3A25组细胞增殖抑制率升高(P<0.05),细胞中CYP3A25 mRNA,PXR、CAR蛋白水平降低(P<0.05).结论 姜黄素可上调CYP3A25水平,促进药物代谢,实现对ALD的缓解,这一过程可能与升高PXR、CAR表达有关.
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