抗对虾白斑综合症病毒单链抗体P1D3基因在毕赤酵母中的分泌表达

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为了将可中和对虾白斑综合症病毒(wssv)的单链抗体P1D3在酵母中实现表达,以原核表达载体M13噬菌粒为模板,设计带有SnaBI和EcoRⅠ酶切位点的特异性引物,通过PCR方法扩增P1D3基因。经过酶切、连接反应将该基因连入大肠杆菌-酵母穿梭质粒pPIC9K上。重组质粒pPIC9K—scFvP1D3经BgtⅡ线性化后,用电转化的方法转入毕赤酵母(Pichia pastoris)GS115中。通过PCR和DNA测序,挑选和鉴定阳性克隆。经甲醇诱导,P1D3在酵母中获得分泌表达。ELISA实验结果表明,酵母
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