一种基于AllGloTM探针的侵袭性曲霉菌病诊断技术的建立与评价

• 作 者: 吴淡森 沈建箴 周晓强 沈松菲 吴雪梅
• 机 构: 350001，福州，福建医科大学附属协和医院 福建省血液病研究所,350001，福州，福建医科大学附属协和医院 福建省血液病研究所,福建省分子诊断技术工程实验室,350001，福州，福建医科大学附属协
• 出 处: 中华内科杂志
• 发表日期: 2010年49期
• 关键词: 曲霉菌病 真菌 核酸扩增技术 诊断

目的　建立并评价一种基于AllGlo^TM探针的侵袭性曲霉菌病诊断技术。方法　对目标基因进行克隆化并制备成标准品，用自行设计的AllGlo^TM探针和引物对标准品进行核酸扩增，制定定量检测标准曲线，对方法的特异性、敏感性、重复性进行评价。结果　黄曲霉和烟曲霉AllGlo^TM荧光核酸扩增的标准曲线分别为Y＝－3.003X＋36.825和Y＝－3.052X＋38.016，其批间变异系数分别为15.60％和12.94％，表示重复性良好，敏感性达10CFU/ml，相当于100～1000拷贝转录间隔区（ITS）2基因，与其他真菌、人类基因组及细菌无交叉阳性反应，特异性强。结论　这种基于AllGlo^TM探针的侵袭性曲霉菌病诊断技术具有较好的重复性、特异性和较高的准确度。