不同形态砷化合物对非致瘤性人源性肝细胞的毒性作用

• 作 者: 郑小曼 顾明华 吕梦婷 陈雪 何冰 王学礼 韦燕
• 机 构: 广西大学农学院农业环境与农产品质量安全重点实验室
• 出 处: 环境与健康杂志
• 发表日期: 2004年期
• 关键词: 砷化合物形态 非致瘤性人源性肝细胞 细胞凋亡
• 基金项目: 国家自然科学基金(41401574;41561092);中国博士后基金(2015M572418);广西土壤环境污染与生态修复人才小高地项目(2013-32);广西特聘专家工程专项经费项目资助(2013B015)

目的探讨不同形态砷化合物对非致瘤性人源性肝（QSG7701）细胞的毒性及氧化应激作用。方法将处于对数生长期的QSG7701细胞分别暴露于亚砷酸钠（砷浓度为1、5、25、100μmol/L）、砷酸钠（砷浓度为10、25、100、500μmol/L）及MMA和DMA（砷浓度均为100、500、1 000、2 000μmol/L）培养24 h,并设对照（含10%胎牛血清的RPMI-1640培养基）。采用四甲基偶氮唑盐（MTT）法测定细胞活性;检测细胞培养液中乳酸脱氢酶（LDH）释放率、谷草转氨酶（AST）活力、总超氧化物歧化酶（T-SOD）活力和丙二醛（MDA）含量。结果一定浓度的As^Ⅲ（≥1μmol/L）、As^Ⅴ（≥10μmol/L）、MMA（≥100μmol/L）和DMA（≥2 000μmol/L）均能显著降低QSG7701细胞的存活率,差异有统计学意义（P<0.05）;且随着As^Ⅲ、As^Ⅴ及MMA和DMA染毒浓度的升高,QSG7701细胞的存活率呈逐渐降低的趋势。经计算,QSG7701细胞暴露于As^Ⅲ、As^Ⅴ、MMA和DMA 24 h的IC₅₀分别为170.89、863.73、2 235.67、4 045.31μmol/L,对QSG7701细胞生长的抑制作用依次为As^Ⅲ>As^Ⅴ>MMA>DMA。在当As^Ⅲ浓度为5¹00μmol/L、As^Ⅴ浓度为10⁵00μmol/L及MMA中的砷浓度为1 000、2 000μmol/L和DMA中的砷浓度为2 000μmol/L时,QSG7701细胞的LDH释放率均高于对照组,差异有统计学意义（P<0.05）;另外,当As^Ⅲ浓度为1¹00μmol/L、As^Ⅴ浓度为10⁵00μmol/L及MMA和DMA中的砷浓度为100² 000μmol/L时,QSG7701细胞培养液中的AST活力均高于对照组;且随着As^Ⅲ、As^Ⅴ及MMA和DMA染毒浓度的升高,QSG7701细胞的LDH释放率和细胞培养液中的AST活力呈上升的趋势。与对照组比较,当As^Ⅲ浓度为5¹00μmol/L、As^Ⅴ浓度为10⁵00μmol/L时,QSG7701细胞中的MDA含量均较高,而T-SOD活力均较低;与对照组比较,当MMA和DMA中的砷浓度均为500² 000μmol/L时,QSG7701细胞中的MDA含量均较高;而当MMA中的砷浓度为100² 000μmol/L和DMA中的砷浓度为100、500μmol/L时,QSG7701细胞中的T-SOD活力均较低,差异有统计学意义（P<0.05）。结论在本实验条件下,4种砷化合物均可不同程度地损伤肝细胞膜,破坏肝细胞的氧化平衡状态,产生氧化应激并导致脂质过氧化,对人肝细胞QSG7701的毒性作用依次为As^Ⅲ>As^Ⅴ>MMA>DMA。