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目的 构建含线粒体促凋亡蛋白基因(Smac)、人尿路斑块蛋白I b(UpI b)启动子调控的真核表达载体,检测其在膀胱癌细胞的表达.方法 MluI+XbaI分别双酶切含Smac的真核表达质粒pcDNA3.1-Smac和UpIb启动子片段,T4DNA连接酶环化目的片段构建新质粒,酶切凝胶电泳和测序鉴定.新质粒转染12孔BIU-87细胞,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测6孔的Smac mRAN表达,免疫组织化学过氧化酶标记的链霉卵白素(SP)法检测另6孔的Smac蛋白表达.结果 pcDNA3.1-Smac中人巨细胞病毒启动子(CMV)和T7噬菌体启动子(T7)被成功替换为UpI b启动子,构建新质粒pcDNA3-UpIb promoter-Smac;转染后BIU-87细胞Smac mRNA表达增强2.1倍、71%癌细胞中Smac蛋白表达增强(P＜0.05).结论 UpIb启动子调控含Smac的真核表达载体构建成功,且能在膀胱癌细胞中有效表达。