【摘 要】
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本研究观察核糖体蛋白L6(RPL6)基因表达的改变对白血病细胞耐药性的作用及其可能的机制.通过RT-PCR方法获得RPL6cDNA序列,用真核表达载体pcDNA3.1(+)分别构建正向插入和反向
【机 构】
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广西柳州工人医院血液科中南大学湘雅医院血液科,长沙,410008;南华大学第一附属医院血液科,衡阳,421001;南华大学病理教研室,衡阳,421001;
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本研究观察核糖体蛋白L6(RPL6)基因表达的改变对白血病细胞耐药性的作用及其可能的机制.通过RT-PCR方法获得RPL6cDNA序列,用真核表达载体pcDNA3.1(+)分别构建正向插入和反向插入的RPL6 cDNA重组质粒.以脂质体将正义RPL6 cDNA真核表达质粒转染K562细胞,将反义RPL6 cDNA真核表达质粒转染K562/AO2细胞.以MTT、流式细胞术和荧光分光光度计观察RPL6对化疗药物耐药性、凋亡和caspase-3的作用.结果表明:转染正义RPL6cDNA真核表达质粒后,K562细胞对阿霉素的耐药性增强到原来的325%,凋亡和caspase-3活性明显降低(P＜0.005);转染反义RPL6 cDNA真核表达质粒后,K562/AO2细胞对阿霉素的耐药性降低原来的38%;凋亡和caspase-3活性明显增加(P＜0.005).结论:RPL6基因过表达通过改变药物诱导的凋亡在K562/A02细胞耐药性的形成中起重要作用.
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