【摘 要】
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目的:建立小鼠骨髓源性树突状细胞(DCs)体外培养和扩增方法,为以DCs为靶点的免疫治疗研究提供基础。方法:制备C57BL/6小鼠骨髓细胞,应用重组小鼠GM-CSF和IL-4体外诱导DCs定向分化,利用倒置相差显微镜和透射电子显微镜进行生长状态和超微结构观察,流式细胞术鉴定DCs纯度及免疫表型,流式细胞微球捕获芯片技术检测培养上清细胞因子含量。结果:重组小鼠GM-CSF和IL-4诱导培养小鼠骨髓细
【机 构】
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解放军总医院第一附属医院病理科,北京100048
【出 处】
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第十四届全军诊断病理、第八届全军病理技术及第十一届北方四战区病理学术会议
论文部分内容阅读
目的:建立小鼠骨髓源性树突状细胞(DCs)体外培养和扩增方法,为以DCs为靶点的免疫治疗研究提供基础。方法:制备C57BL/6小鼠骨髓细胞,应用重组小鼠GM-CSF和IL-4体外诱导DCs定向分化,利用倒置相差显微镜和透射电子显微镜进行生长状态和超微结构观察,流式细胞术鉴定DCs纯度及免疫表型,流式细胞微球捕获芯片技术检测培养上清细胞因子含量。结果:重组小鼠GM-CSF和IL-4诱导培养小鼠骨髓细胞4d,加入脂多糖(LPS)继续培养2d,近90%细胞高表达DCs特征性标志物CD11c,高表达抗原提呈分子MHC-Ⅱ和共刺激分子CD86、CD80,具有典型的树突状形态学特征和分泌炎症性细胞因子IL-6、IL-10、MCP-1、TNF-α和IL-12p70的功能。结论:小鼠骨髓细胞体外诱导培养DCs具有较高的纯度,保持了体内的形态学、免疫表型及功能特征。
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