【摘 要】
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目的:进行增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的克隆、原核表达和纯化以及多克隆抗体的制备,为以后纯化EGFP融合蛋白奠定基础.方法:构建pGEX-4T3-EGFP重组质粒,在大肠杆菌BL21中进行原
【机 构】
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郑州大学基础医学院人体解剖学教研室
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目的:进行增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的克隆、原核表达和纯化以及多克隆抗体的制备,为以后纯化EGFP融合蛋白奠定基础.方法:构建pGEX-4T3-EGFP重组质粒,在大肠杆菌BL21中进行原核表达,用亲和层析法纯化GST-EGFP, 免疫 BAB/C小鼠制备EGFP多克隆抗体.结果:①目的蛋白GST-EGFP表达量为8 g/L.②获得纯抗体溶液5 ml,浓度为0.4 g/L.③EGFP抗体在1GA6FA100 000稀释度时,Western blot检测条带清晰,背景干净.结论:通过优化诱导条件,利
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