猪圆环病毒2型CaP蛋白的表达及在ELISA中的初步应用

• 作 者: 赵玲 朱玲 郭万柱 徐志文 漆信桥 李凤勤
• 机 构: 四川农业大学动物生物技术中心
• 出 处: 畜牧兽医学报
• 发表日期: 2011年6期
• 关键词: 圆环病毒2型 CAP蛋白 间接ELISA porcine circovirus type 2 Cap protein indirect ELISA
• 基金项目: 四川省科技厅应用基础项目（2006J13-047）, “长江学者和创新团队发展计划”创新团队项目（IRT0848）

本研究旨在建立以PCV2Cap蛋白为包被抗原的间接ELISA检测方法,构建猪圆环病毒2型（PCV2）ORF2基因原核表达质粒pET32a-ORF2并转化至Rosetta菌,在1.0mmol.L-1 IPTG和37℃条件下诱导下,Cap蛋白获得高效表达,Western blot检测证实其具有免疫反应活性,以纯化的蛋白为抗原建立了检测猪圆环病毒2型抗体的间接ELISA方法。结果表明抗原最适包被浓度为2.16μg.mL-1;血清最佳稀释度为1∶40;抗原最佳包被条件为4℃过夜;最佳封闭条件为1%BSA 37℃1