【摘 要】
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目的 探讨微小RNA-645(miR-645)在幽门螺杆菌(Hp)感染的胃癌细胞中的作用,重点分析miR-645在Hp感染胃癌细胞中的表达及其对细胞增殖、侵袭和迁移的影响.方法 采用实时荧光定
【机 构】
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610072 成都 四川省医学科学院 四川省人民医院老年科;610072 四川省医学科学院 四川省人民医院老年消化科
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目的 探讨微小RNA-645(miR-645)在幽门螺杆菌(Hp)感染的胃癌细胞中的作用,重点分析miR-645在Hp感染胃癌细胞中的表达及其对细胞增殖、侵袭和迁移的影响.方法 采用实时荧光定量PCR(qPCR)检测人正常胃上皮细胞(GES-1)和胃癌细胞(BGC-823和SGC-7901)的miR-645水平.在Hp感染的BGC-823细胞中转染miR-645抑制物(inhibitor)并将细胞分为3组:对照组、NC组和Inhibitor组.CCK-8法、划痕实验和Transwell小室实验分别检测Hp阳性BGC-823细胞的增殖、迁移和侵袭能力.荧光素酶报告基因实验验证miR-645与潜在靶基因干扰素诱导蛋白2(IFIT2)的关系.结果 与Hp阴性细胞相比,miR-645在Hp阳性GES-1细胞(1.00±0.07 vs.1.81±0.17)、Hp阳性SGC-7901细胞(1.00±0.05 vs.3.47±0.15)和Hp阳性BGC-823细胞(1.00±0.06 vs.4.00±0.34)中的水平均升高(P<0.05).Hp阳性SGC-7901细胞和BGC-823细胞的miR-645水平分别为1.92±0.08和2.22±0.19,均高于Hp阳性GES-1细胞的1.00±0.10(P<0.05).与对照组和NC组相比,Inhibitor组Hp阳性BGC-823细胞的增殖活力在转染后48、72 h后均下降(P<0.05).Inhibitor组Hp阳性BGC-823细胞的划痕愈合率和穿膜细胞数分别为(11.48±1.67)％和(139.20±8.27)个,低于对照组的(48.36±8.15)％和(288.91±11.92)个及NC组的(45.87±2.86)％和(272.50±10.15)个,差异有统计学意义(P<0.05).生物信息学预测和荧光素酶报告分析确定了抑癌基因IFIT2是miR-645的下游靶基因,且Inhibitor组IFIT2水平高于对照组和NC组(P<0.05).结论 miR-645作为一种促癌miRNA,通过靶向抑癌基因IFIT2来促进Hp阳性胃癌细胞的增殖、迁移和侵袭过程.本研究有助于进一步阐明胃癌进展的机制,为胃癌的治疗提供一定理论基础.
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