人DDR2基因pShuttle-CMV穿梭载体的构建及表达

来源 :第四军医大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:xinran200391127
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目的:构建带有flag标签的人DDR2 pShuttle-CMV载体,检测其真核表达并观察DDR2分子的亚细胞分布.方法:以含有人全长DDR2 cDNA的质粒为模板,用PCR方法扩增DDR2基因的C-端(DDR2-C),并在其C末端带上含24bp的flag标签,NcoI/EcoR V酶切后亚克隆人含有DDR2全长序列的pMD18-T载体,即替换掉原有DDR2序列的C-端,引人flag标签,测序正确后再克隆人pShuttle-CMV表达载体,酶切鉴定正确后采用脂质体法瞬时转染HEK293细胞,West-er
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