观察淫羊藿苷对体外培养的成骨细胞增殖、分化及矿化的影响。
方法选用小鼠来源的MC3T3-E1细胞株作为成骨细胞前体细胞,采用终质量浓度为0、10-4、10-5、10-6、10-7、10-8 mol/L的淫羊藿苷进行药物干预培养,噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖能力;苏木素-伊红(HE)染色观察细胞形态及细胞生长密度;碱性磷酸酶(ALP)试剂盒检测成骨细胞ALP活性,评价成骨细胞早期分化能力;茜素红染色观察钙结节形成数量,评估成骨细胞矿化能力。
结果MTT结果显示,浓度为0、10-4、10-5、10-6、10-7、10-8 mol/L的淫羊藿苷各组的吸光值分别为0.54±0.04、0.28±0.01、0.40±0.02、0.67±0.03、0.58±0.01、0.55±0.03,10-6 mol/L组吸光度值明显高于其他组,差异有统计学意义(P=0.002);HE染色结果显示,正常成骨细胞呈典型的梭形、三角形、多角形等不规则形态分布,与空白对照组比较,在浓度为10-6 mol/L组的细胞数量最多,细胞分布密度最大;浓度为10-4 mol/L组整个视野下很难找到伸展开的成骨细胞。ALP活性检测结果显示,浓度为0、10-4、10-5、10-6、10-7、10-8 mol/L各组的ALP表达量分别是(1.75±0.11)、(0.85±0.35)、(1.50±0.21)、(2.80±0.12)、(2.10±0.36)、(1.80±0.23) U/g prot,10-6 mol/L组中的成骨细胞ALP活性表达量最高(P=0.001),10-4 mol/L组表达量最低(P=0.001),差异有统计学意义,10-8 mol/L组的ALP活性略高于空白组,但差异无统计意义(P=0.292)。茜素红染色结果显示,与对照组比较,10-6 mol/L的淫羊藿苷显著促进成骨细胞矿化,有大量钙结节形成并积聚成团;10-4 mol/L的淫羊藿苷组几乎未发现钙结节形成。
结论一定浓度的淫羊藿苷能促进成骨细胞增殖、分化及矿化。