脂筏特异蛋白荧光标记及在PC12细胞中的功能

• 作 者: 曹惠雅 李臣鸿
• 机 构: 华中科技大学生命科学与技术学院
• 出 处: 华中科技大学学报：自然科学版
• 发表日期: 2006年1期
• 关键词: 脂筏 小窝 PC12细胞 荧光标记 lipid raft caveolae PC12 cell fluorescence labeling
• 基金项目: 国家自然科学基金资助项目（30470646,30130230）,国家重点基础研究发展计划资助项目（2004CB720000）,湖北省自然科学基金资助项目（2003ABA096）.

采用PCR技术从小鼠cDNA文库中扩增出编码caveolin-1和flotillin-1基因片断，通过TOPO载体将基因克隆到表达载体pEGFP，转化至大肠杆菌DH5α中，抽提、纯化后将重组质粒转入PC12细胞中表达，用TIRFM观察高K^＋刺激下胞内标记蛋白的动态分布情况．实验结果显示重组质粒caveolin-1-pEGFP和flotillin-1-pEGFP在PC12细胞中具有一定的功能，而且caveolin-1和flotillin-1在发挥功能时可能有一个向膜转运的过程．