青海血蜱cDNA表达文库的免疫学筛选和阳性克隆的鉴定

• 作 者: 高金亮 罗建勋 樊瑞泉 魏永红 李文卉 任巧云 关贵全 殷宏
• 机 构: 中国农业科学院兰州兽医研究所,甘肃农业大学动物医学院,甘肃省临潭县畜牧中心
• 出 处: 中国兽医学报
• 发表日期: 2006年6期
• 关键词: 青海血蜱 CDNA表达文库 免疫学筛选 Haemaphysalis qinghaiensis cDNA expression library immunoscr
• 基金项目: 国家自然科学基金资助项目（30270992）,国家“863”计划资助项目（2003AA241110）

为获得抗青海血蜱免疫原基因，用免抗青海血蜱差异蛋白阳性血清和兔抗青海血蜱唾液蛋白阳性血清对青海血蜱cDNA表达文库进行了免疫学筛选，经过初筛和复筛共获得58个阳性信号。用所得阳性噬菌体转染宿主菌BM25．8使之自动亚克隆为重组质粒，用此亚克隆质粒转化宿主菌JM109并从中提取重组质粒进行PCR、酶切和测序分析。序列分析表明：共获得新cDNA序列21个。将前5个cDNA登录GenBank／ncbi，获取登录号。所获阳性克隆为青海血蜱保护性抗原的筛选奠定了基础。