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目的：观察Intermedin对糖尿病大鼠心肌缺血再灌注后炎性细胞因子的影响,从而进一步探讨Intermedin对糖尿病心肌缺血再灌注损伤保护作用的机制.
方法：健康雄性SD大鼠74只,给予适应性饲养一周后,将74只雄性SD大鼠随机分为糖尿病组(50只)和非糖尿病组(24只).非糖尿病组给予枸橼酸缓冲液腹腔注射,糖尿病组建立糖尿病大鼠模型,通过腹腔注射链脲佐菌素复制I型糖尿病大鼠模型.然后阻断大鼠冠状动脉左前降支30min制备心肌缺血再灌注损伤模型.将成功造模的大鼠随机分为5个实验组：对照组(NS)、缺血再灌注组(NIR)、糖尿病组(DS)、糖尿病缺血再灌注组(DIR)和应用Intermedin干预的治疗组(IMD).应用ELISA法测定血清中炎性细胞因子TNF-α、IL-6和IL-1β的含量.应用RT-PCR法检测心肌组织中TNF-α、IL-1β和IL-6的mRNA的表达.免疫组织化学S-P法和Western-blot检测心肌组织NF-κB的表达.
结果：与各自对照组和糖尿病组比较,NIR组与DIR组大鼠血清中TNF-α、IL-6、IL-1β含量升高(P＜0.05).但是同DIR组比较,IMD组大鼠血清中TNF-α、IL-6、IL-1β含量则明显降低.(P＜0.05).NIR组和DIR组大鼠心肌组织中TNF-α、IL-6、IL-1βmRNA表达与各自对照组和糖尿病组比较均明显增强(P＜0.05).IMD组TNF-α、IL-6、IL-1βmRNA表达比DIR组明显减弱(P＜0.05).免疫组织化学结果显示,当心肌缺血再灌注后其心肌组织中可观察到核移位的现象,即在NIR组和DIR组中NF-κB活化增强,阳性颗粒出现在胞浆和胞核.而在对照组和糖尿病组大鼠心肌组织中观察到NF-κB呈低表达状态,并且阳性表达出现在胞浆中.同DIR组相比较,IMD组NF-κB的表达活性将低,阳性表达的细胞数明显减少(P＜0.05).Westernblot结果显示：分别与对照组和糖尿病组相比较,NIR组和DIR组NF-κB表达量均显著增加(P＜0.05),而IMD组NF-κB表达显著低于DIR组(P＜0.05).
结论：Intermedin对糖尿病大鼠心肌缺血再灌注具有保护作用,其部分保护作用机制可能与intermedin可以抑制NF-κB活化,从而减少炎性因子如TNF-α、IL-1β和IL-6的表达,减轻炎症反应有关.