【摘 要】
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目的 探究长链非编码核糖核酸生长组织特异性转录体5(LncRNA GAS5)通过AKT/mTOR通路对结肠癌SW480细胞增殖和凋亡的影响.方法 体外培养人结肠癌细胞SW480,随机分为对照组、Ln
【机 构】
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江苏省昆山市第一人民医院,江苏昆山,215300;江苏南通大学附属医院肿瘤科,江苏南通,226019
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目的 探究长链非编码核糖核酸生长组织特异性转录体5(LncRNA GAS5)通过AKT/mTOR通路对结肠癌SW480细胞增殖和凋亡的影响.方法 体外培养人结肠癌细胞SW480,随机分为对照组、LncRNA GAS5过表达质粒组、LncRNA GAS5空载质粒组、LncRNA GAS5 siRNA组、LncRNA GAS5 siRNA阴性对照组,分别转染质粒及siRNA后,采用实时荧光定量(qRT?PCR)检测各组细胞LncRNA GAS5表达,采用CKK?8、细胞克隆形成实验检测细胞增殖情况,采用流式细胞术检测细胞凋亡情况,免疫印迹检测各组细胞凋亡相关蛋白[B淋巴细胞瘤-1(Bcl?2)、关联BCL?2的蛋白质X(Bax)、半胱氨酸蛋白酶-3(caspase?3)]、AKT/mTOR通路蛋白[丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(AKT)、磷酸化丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(p?AKT)、哺乳动物雷帕霉素靶点(mTOR)、磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶点(p?mTOR)]表达情况.结果 与对照组相比,LncRNA GAS5 siRNA组SW480细胞LncRNA GAS5表达、凋亡率、Bax及caspase?3蛋白表达降低,细胞活力、相对细胞克隆形成、Bcl?2蛋白表达、p?AKT/AKT、p?mTOR/mTOR升高,差异均有统计学意义(P<0.05);LncRNA GAS5过表达质粒组SW480细胞LncRNA GAS5表达、凋亡率、Bax及caspase?3蛋白表达升高,细胞活力、相对细胞克隆形成、Bcl?2蛋白表达、p?AKT/AKT、p?mTOR/mTOR降低,差异均有统计学意义(P0.05).结论 上调LncRNA GAS5可抑制SW480细胞增殖,促进其凋亡,可能是通过抑制AKT/mTOR通路激活实现的.
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